Date de début
Objectifs visés
Fournir une formation théorique et pratique en chromatographie en Phase Liquide (HPLC/UFLC). Les personnels confrontés à ces techniques, spécialement ceux ayant une formation en sciences du vivant, manquent souvent de repères théoriques et pratiques leur permettant de choisir ou d’adapter la technique aux objectifs souhaités mais également leur permettant de définir au plus juste les conditions expérimentales nécessaires à leur travail.
Cette formation propose donc de répondre à ces différentes attentes en traitant d’une part de l’aspect purement théorique de cette technique et, d’autre part en proposant aux participant.e.s de mettre en pratique de nombreuses conditions expérimentales qui feront l’objet d’une analyse pendant la formation.
Contenu
Organisation de la formation
Partie théorique (14h)
Théorie de l’HPLC-UFLC
- Généralités sur la chromatographie en phase liquide
- Les différents modes de chromatographie en phase liquide (adsorption, de partage en phases normale et inversée, par échange d’ions,d’exclusion)
- Les grandeurs en HPLC/UFLC
- Modes d’élution (isocratique, gradient)
Présentation et appareillage
- Constituants d’un système HPLC-UFLC
- Principe de fonctionnement, rôle et intérêt des dégazeurs, pompes,
injecteurs, fours, détecteurs (UV, PDA, Fluo, Electrochimie, Masse)
- Colonnes (principe général de la séparation et notion de mode
chromatographique)
Traitement des données
- Principe de l’intégration
- Principe de l’étalonnage externe / interne
- Précautions d’usage et problèmes courants
- Préparation des échantillons
- Précautions d’utilisation de la colonne, démarrage et arrêt du système
- Problèmes de pression, bruit de fond anormal ou dérive du signal
- Apparition de pics parasites, déformation des pics, problèmes de
temps de rétention
L’HPLC-UFLC aujourd’hui
- La très haute pression
- La détection de masse
Partie pratique (14h)
Mise au point d’une méthode HPLC-UFLC pour la détection d’un
médicament dans une matrice biologique
- Principe de l’intégration
- Principe de l’étalonnage externe / interne
- Précautions d’usage et problèmes courants
- Préparation des échantillons
- Précautions d’utilisation de la colonne, démarrage et arrêt du système
- Problèmes de pression, bruit de fond anormal ou dérive du signal
- Apparition de pics parasites, déformation des pics, problèmes de
temps de rétention
Des modifications mineures peuvent être apportées sous la
responsabilité de l’encadrement pédagogique
Du 8 au 11 juin 2020
4 jours / 28 heures
2000 €
(TVA 0% incluse)
Contrôle des connaissances
MOYENS PERMETTANT DE SUIVRE L’EXECUTION DE L’ACTION ET D’EN APPRECIER LES RESULTATS:
Liste d’émargement
Questionnaire de satisfaction
MODALITES D’EVALUATION:
Attestation de formation délivrée par l’Université.
Aménagements particuliers
MOYENS PEDAGOGIQUES ET TECHNIQUES D’ENCADREMENT:
Ressources humaines :
Enseignant.e.s-chercheur.e.s de l’Université Paris Diderot
Ressources matérielles :
Locaux de l’Université, Plateforme BioProfiler (http://bfa.univ-parisdiderot.
fr/bioprofiler-les-systemes-uflc/), Bâtiment Buffon, 4 rue M.A.
Lagroua Weill Hallé 75013 Paris.
Supports pédagogiques format PDF sur clé USB
Public Cible
Prérequis
Technicien.ne.s, ingénieur.e.s, chercheur.e.s des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.
Conditions d’ouverture : 6 inscriptions minimum et 12 maximum.
Pré-requis
Notions élémentaires de physico-chimie et de biochimie.
Droits de scolarité
2000 €
Compétences visées
Acquérir les connaissances nécessaires pour la maîtrise d’une chaîne HPLC/UFLC dans le cas d’une séparation analytique ou du dosage d’un composé et plus particulièrement dans un contexte biologique.
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